KC Schrempf

Vollenzymatische UV Methode (Urease/GLDH)

Harnstoff+ 2H20 —>Urease—> 2NH4+ + 2 HCO3-

a-Ketoglutarat+ NH4+ + NADH —>GLDH —>L-Glutamat + NAD+ +H2O

· Niereninsuffizienz Nierenschaden (>75%)

· Nierenversagen

· Überwachung Proteinstoffwechsel (Intensivtherapie bei künstlicher Ernährung)

Probe: 10 µl

Reagenziengemisch: 1000 µl

E1 nach 30 sek.; E2 nach + 60 sek

Serum Harnstoff = Sollwert Std. x Δ E (Probe) / Δ E (Std)

Urin Harnstoff= Sollwert Std. x Δ E(Probe)/ Δ (Std)x 100

Harnstoff(g/24h)= (mg Harnstoff/dl x Liter Urin/24h)/ 100

· Erwachsene global 17-43 mg/dl

· Harnstoff abhängig von Eiweißzufuhr

24 h SU: 20-30 g/24h

4 Teile R1 + 1 Teil R2 (Urease)

· Harnstoff: Abbauprodukt Aminosäurestoffwechsel /Proteinstoffwechsel

· Konzentration: stark abhängig von Proteinzufuhr; Proteinabbau, Diurese

· Erst Einschränkung Nierenfunktion auf <25% àAnstieg Serumharnstoffkonzentration àweiterer Nierenparameter notwendig

· Fluorid+ Ammoniumheparinat stören die Reaktion

· Methode: kinetisch nach Jaffe ohne Enteiweißung

Kreatinin+ Pikrinsäure à Alkalische Lösung àKreatinin- Pikrinsäure- Komplex

Krea bildet in alkalischer Lösung mit Pikrat gelb-orangenen gefärbten Komplex

· : Verdacht ANV/CNV, Diabetes, Hyperurikämie, Kollagenosen

· Vor Diagnostik/Therapie die für normale Nierenfunktion ausgelegt sind

Vorbereitung der Proben:

Urinproben werden 1:20 mit Aqua dest. verdunnt

Photometerprogramm: 200

Wellenlange: 480-540 nm

Inkubationstemperatur: 37 °C

Schichtdicke Kuvette: 1 cm

Std: 50 µl ; Reagenz 500 µl

E1: nach 20 Sek

E2: + nach 60 sek

Serum Kreatinin = Sollwert Standard x E Probe/ E Std

Urin Kreatinin= Sollwert Std x E Probe/ E Std x 20

Erwachsene männlich 0,6-1,1 mg/dl

Weiblich 0,5-0,8 mg/dl

Kinder 1-6 Tag 0,3-1,0 mg/dl

7. Tag – 12 Jahre 0,2-0,6 mg/dl

4 R1+ 1 R2 (Pikrinsäure)

Bilirubin ab 4 mg/dl

Hämoglobin ab 500 mg/dl

Triglyceride ab 2000 mg/dl

Ascorbinsäure ab 30 mg/dl

Test ist bis 5 mg/dl im Serum bzw. 250 mg/dl linear im Blut

R1 Natronlauge NaOH 300 mmol/l

Di-Na-Phosphat 25 mmol/l

R2 Piktrinsäure Piktrinsäure 8,7 mmol/l

R3 Std Creatinin 2 mg/dl

Krea= (Urin Krea mg/dl x Vol (ml)/ Serum Krea mg/dl x zeit (min))= ml/min

S= Wurzel (Lx M/ 3600) x 1,73 ; L: Körpergröße, M: Masse

· Aufgabe: Messung von Krea- Clearance + Berechnung

· Methode: Kreatinin Jaffe

· Verdacht auf Nierenversagen, ANV, Verlaufskontrolle bei Systemkrankheit (Diabetes) , Kontrolle bei Medikamenteneinnahme

Männer ( 25) 95-140

Männer( 50) 70-115

Männer (75) 50-80

Frauen (25) 70-110

Frauen (50) 50-100

Frauen (75) 35-60

Sammelfehler d. Patient*innen

bei eindeutig hohen Serum Kreatinin (>3 mg/dl) -> Inulin Clearance

Messung von GLucose

Enzymatischer Farbtest auf Basis der Trinder-Reaktion

GLucose+ O2+ H2O —>Glucose Oxidase—>Gluconsäure+ H2O

2 H2O2+ Phenol+ 4- Amino-Antipyrin —>Peroxidase —> roter Chinoniminfarbstoff + 4 H2O

• Nachweis Hypoglycämien

• Nachweis/Ausschluss einer gestörten GLucosetoleranz (OGTT)

• Nachweis/Ausschluss DIABETES mellitius (Typ 1, Typ 2, Gestationsdiabetes)

• Therapiekontrolle bei DIabetes u.a. (z.B. parenterale Ernährung)

nü Vollblut: 60-100 mg/dl

nü serum(Plasma: 55-115 mg/dl

postprandial 30-60 mg/dl höher als nüchtern

Urin: <0,1 g/24h

• Vollblut ohne Gylkolysehemmer ->Glykolyse

  ; weitere Verstoffwechslung ex vivo

AUfgabe: Messung von Kreatinin

Methode: Enzymatischer Farbtest PAP Trinder- Methode

Zweipunktmessung, PAP (Phenylderivat, Aminophenatin, Peroxidase), enzymatisch

• Verdacht akutes/chronisches Nierenversagen, Diabetes, Hyperurikämie, Kollagenosen

• Vor Diagnostik/ Therapie die für normale Nierenfunktion ausglegt ist

• abhängig von Masse+ Alter; Kreabilnder BEreich bis 50%, EInschränkung der GFR

• cave: Muskulöse Pat. haben physiologisch erhöhten Kreawert ohne Nierenschädigung

• magersüchtige Personen: können bei Nierenschädigung normale Werte haben

• keine wesentliche Beeinflussung von Bilirubin bis 36 mg/dl

• TG> 600 mg/ dl

• Glucose >1000 mg/ dl

• Test ist bis 30 mg/ dl linear

• untere Nachweisgrenze : 0,025 mg/dl

• AUfgabe: Qualitätssicherung im klinishc chemischen Labor

• Methode: Interne Qualitätskontrolle

• Grundlagen: RILIBÄK

Teil A: Grundlegende Anforderungen an die QS laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen

Teil B: Spezielle Teile

B1-> quantitative laboratoriumsmedizinische Untersuchungen

Tabelle B1a: Blut, Plasma, Serum

Tabelle B1b: Urin

Tabelle B1c: Liquor

• Einzelabweichungen: wenn innerhalb der Grenzen —>Messung kann verwendet werden

• wenn QMMA% Wert innerhalb der erlaubten Grenzen —> Messung ist zusätzlich präzise

Einzelabweichung überschritten:

• Gerät oder Einzeltest muss bis auf weiteres für Messungen gesperrt werden

• Ursachen für den Fehler müssen Gefunden werden und die Kontrollmessung wiederholt werden

Aufgabe: Auftrennung von Serumproteinen

Methode: Trennung von Serumproteinen mittels Elektrophorese

• Proteine: bei EPHO Auftrennung in verschiedene Fraktionen

  ->Albumin, a1, a2, ß, y-Globuline

  ->Alle Fraktionen ergeben Gesamteiweiß

• Proteine werden zur AUftrennung auf ein Trägermaterial (Agarosegel) aufgebracht; Alkalischer Puffer ->Proteine können Protonen abgeben ->negative Ladung

• Gleichstrom: Proteine wandern von Kathode (-Pol) zur Anode (+Pol

• Wanderungsgeschwindigkeit der Proteine : abhängig/ Trennung nach Ladung, Molekülgröße+ Trägermaterial

  ->Denaturierung+ Fixierung der Proteine im Gel

  ->Färbung: Amidoschwarz oder Säureviolett (Proteinfarbstoff)

• bei Entfärbung: Abwaschen des überschüssigen Farbstoffs

• endugültge Fixierung durch Trocknung

• Lebererkrankungen+maligne Tumore (Sarkome, maligne Lymphome)

• AK-MAngel

• erhöhte BSG

• nephrotisches Syndrom

• pathologische Gesamteiweiß-Werte

• Luftblasen

• zu viel Probenmaterial

• Auftrennzeit nicht beachtet

• Fehler bei Färbung

• Falsche Auftragsstelle

• Verdünnung bei Serumepho

• Plasma statt Serum (Fibrinogen) verwendet

• Hämolyse: extra Fraktion in ß-Fraktion

Aufgabe: Messung von Eiweiß im Serum

Methode: Colorimetrischer Test, Biuret MEthode

Eiweiß+ Cu 2+ —>alkalische Lösung —>Cu-Eiweiß- Komplex

• nur für Serum + Plasma verwenden

• ungeeignet für geringe Proteinkonzentrationen in Liquor oder Urin

• Urin stört durch hohe Harnstoffkonzentration

• nephrotisches Syndrom

• starker Blutverlust

• Sprue

• schwere Verbrennungen

• Salzretentionssyndrome

• Kwashiorkor (akuter Proteinmangel)

schwere Dehydratation

Multiples Myelom

Prinzip nach Jendrassik+ Grif

Bilirubin-diazotierte Sulfanylsäure ->neutrales Miliseu -> roter Azofarbstoff

Diagnose, differentialdiagnose und Verlaufsbeurteilung des Ikterus

< 1,1 mg/dl

<0,3 mg/dl

lichtexposition der probe

• Infektionen (Malaria)

  ->Tests: LDH, Blutausstrich, Infektionsserologie

• Ineffektive Erythropoese

  ->Tests, Blutbild, Vitamin B12, Folsäure

• Infektionen (Malaria)

  ->Tests: LDH, Blutausstrich, Infektionsserologie

• Ineffektive Erythropoese

  ->Tests, Blutbild, Vitamin B12, Folsäure

• Infektiöse+ toxische Schädigung des Leberparenchyms

  ->Tests: Infektionsserologie, Toxikologische Untersuchungen

• Leberzirrhose

  ->GOT, GPT, y-GT