Übung III, IV

1.    Was ist ein GVO?

1.    Nennen Sie 3 charakteristische Regionen eines Plasmidvektors:

1.    An welcher Stelle wird der Vektor für die Klonierung geöffnet?

1.    Wie oft kommen die für eine Klonierung verwendeten Restriktionsschnittstellen im Plasmidvektor vor?

1.    Sie sollen eine Restriktionsspaltung mit einem Gesamtvolumen von 50 µl ansetzen. Wie viel µl des 10x Restriktionspuffers müssen Sie pipettieren?

1.    Worin unterscheidet sich eine präparative von einer analytischen Gelelektrophorese?

1.    Sie benötigen 1 Liter 1x TAE-Puffer für die Elektrophorese. Wie müssen Sie die Stammlösung mit einer Konzentration von 50x TAE mit Wasser verdünnen?

1.    Wie wird bei der Gelelektrophorese die Länge einer DNA ermittelt?

1.    Welche Stoffe/Zusätze verwenden Sie für die Fällung von DNA und was bewirken diese?

1.    Welche beiden Methoden haben Sie kennen gelernt, um DNA-Fragmente von anderen DNA-Molekülen, wie z. B. Polylinker oder Restvektor, zu trennen?

1.    Mit welchen Zutaten wird DNA gefällt? (2 Zutaten)

1.    Welcher pH-Wert ist für die Fällung von DNA günstiger?

1.    Wo befindet sich nach der Fällung und Zentrifugation die Polylinker-DNA?

1.    Wozu dient der Inkubationsschritt bei 50 °C während der Fragment-Isolierung mit dem NucleoSpin Kit?

1.    Welches Säulenmaterial enthält das NucleoSpin-Säulchen und über welche Bindung bindet die DNA?