Nennen Sie das Prinzip der Immunhistologie/Immunhistochemie
immunhistologischer Nachweis von Antigenstrukturen im fixierten Gewebe
spezifische Erkennung von AG in Zellen/Geweben mithilfe von AK und der sichtbare NW der AG-AK-Reaktion
Wie wird das Antigen im Gewebeschnitt sichtbar gemacht?
immunhistologische Nachweisreaktion durch Antikörper-Bindung
-> Fluoreszenz, Enzymmarkierung, Nanogoldpartikel -> Farbentwicklung durch Markersubstanz
Mit welchem Mikroskop kann eine AG-AK-Reaktion betrachtet werden, wenn
a) enzymkonjugierte AK eingesetzt werden -> Farbniederschläge
b) fluoreszenzkonjugierte AK eingesetzt werden -> Fluoreszenzfarbstoffe
c) nanogoldkonjugierte AK eingesetzt werden
a) Lichtmikroskop
b) Fluoreszenz-Mikroskop
c) Elektronenmikroskop
Welche Anwendung findet die Immunhistologie in der Diagnostik?
Nachweis von pathologischen Veränderungen im Gewebe
-> Tumordiagnostik
-> Identifikation des Tumortyps/von infektiösen Erregern, Klassifizierung von malignen Tumoren
Nennen Sie den Begriff, wenn AK mit Markersubstanzen gekoppelt sind
konjugiert
Nennen Sie die 2 Enzyme, die bei Enzymnachweismethoden eingesetzt werden
Alkalische Phosphatase
Meerrettischperoxidase
Erläutern Sie das Reaktionsprinzip, wenn Enzymmarker eingesetzt werden
Enzyme reagieren mit zugesetztem Substrat und H2O2 zu einem Farbumschlag
Welchen Vorteil bringt der Einsatz einer Enzymnachweismethode?
Nachweisreaktion ist sehr spezifisch durch Substrat- und Reaktionsspezifität
Benennen Sie alle 3 Markersubstanzen
Enzyme (Alkalische Phosphatase und Meerrettichperoxidase), Fluoreszenzfarbstoffe, Nanogoldpartikel
Nennen Sie die Markersubstanz der Streptavidin- und dder Polymermethode
Enzyme
Benennen Sie den AK, der in der indirekten 2-Schritt-Methode zum gezielten NW führt
der konjugierte SekundärAK
Erklären Sie, warum AG in einem Gewebeschnitt vor einer immunhistochemischen Färbung demaskiert werden müssen
Um durch Formalin vernetzte AG durch Kochen oder enzymatisch wieder für die AK zugänglich zu machen
Benennen Sie immunhistochemische NWmethoden welche eine hohe Signalwirkung aufweisen
Indirekte 3-Schritt-Methode, Polymer, Streptavidin-Biotin
Warum können durch den Einsatz von polyklonalen AK in einer immunhistochemischen Färbung falsch positive Ergebnisse erzielt werden?
Durch unspezifische Bindung der polyklonalen AK bzw. Kreuzreaktivität mit ähnlichen Epitopen
Nennen Sie die nötigen Gewebevorbehandlunge, bevor der PrimärAK an einem Paraffinschnitt eingesetzt werden kann
Entparaffinierung, AG-Demaskierung, Blocken unspez. Bindungen
Erklären Sie den Begriff Immunfluoreszenz
Mithilfe von fluoreszenzmarkierten AK werden AG im Gewebe sichtbar gemacht
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