Definition mikroaerophiles Bakterium
Bakterien, die am besten wachsen können,
wenn der O2-Gehalt im Nährmedium deutlich geringer ist,
als bei Sättigung mit normaler Luft (aerobe MOs)
Nalidixinsäure
Hemmt DNA-Gyrase (DNA-Replikation)
Gram +
Gram -
Ampicillin
Hemmt Zellwandsynthese
Penicillin
Kanamycin
Bindet an 30S-Ribosomen-Untereinheit
Führt zu Nonsense-Proteinen
Steriles Animpfen
Steriler Arbeitsplatz
Öse ausglühen
Rand des Reagenzglases abflammen
Abgekühlte Öse mit Bakteriensuspension benetzen
Die Agarplatte mit der Öse bestreichen (nicht reindrücken)
Reihenfolge siehe Skizze
Nach dem 3ten und 6ten Strich die Öse nochmal ausglühen (und abkühlen)
Keimgehaltsbestimmungen natürlicher Habitate
Keimzahl/ml = Kolonie x Verdünnungsfaktor x 10
Wovon ernähren sich die MOs auf dem
Nähragar
Sabouraud-Agar
Peptisches Pepton (Blut)
Pankreatisches Pepton (Kasein)
Pepton
Glucose
Vorteile fester Nähragarplatten
Koloniebildung
Reinkultur
Selektionsmedium
…
Konkurrenz um NS minimierbar
Auch langsam wachsenden Bakterien können kultiviert werden
Nach welche Kriterien werden Nährmedien unterteilt
Konsistenz
Verwendungszweck
Zusammensetzung
Was macht Ampicillin
Verhindert Neusynthese einer stabilen Zellwand
Blockiert Ausbildung von Mureinschicht
Bei Menschen wirkungslos
keine Mureinschicht in Zellen
Welche Zelleinschlüsse in Bakterienzellen gibt es
Magnetosomen
Speicherstoffe
-> S
-> C
Gasvesikel
Endosporen
Welche Begeißelungstypen gibt es bei Bakterien
Holotrich
Zahlreiche Flagellen umfassen gesamte Oberfläche
Peritrich
Viele Flagellen gleichmäßig über Oberfläche verstreut
Polytrich-bipolar
Gruppe von Flagellen an gegenüberliegenden Zellpolen
Lophotrich
Gruppe von Flagellen an einem der Zellpole
Monotrich
Eine einzige Flagelle
Wie werden Lebendkeimzahlen / Keimgehalte eines Habitates bestimmt
Lebenskeimzahl
Ausplattieren und zählen
Keimgehalt
Mithilfe aussagekräftiger Verdünnungsreihe
Keimzahl / ml = Koloniezahl x Verdünnungsfaktor x 10
Was ist Agar
Wozu wird er im Praktikum eingesetzt
Verfestigungsmittel zur Herstellung fester Nährböden
(kein Nährstoff!!)
Komplexes Polysaccharid aus Meeresalgen
Schmilzt erst bei ca 100°C
-> Autoklavierbar
Flüssig bis 45°C
In welcher Konzentration wird Agar angesetzt
In der Regel
1,5 - 2 % [w/v]
15-20 g/l
Nennen sie 2 Sterilisationsverfahren
Autoklavieren
121°C
20 Min
1 bar Überdruck
Abflammen / Ausglühen
Definieren sie das Prinzip der Anreicherung von Bakterien
Erläutern sie es anhand eines BSP aus dem Praktikum
Ziel:
Die Population einer Probe so zu vermehren,
dass ein Vielfaches der MO-Menge
für weitere Untersuchungen zur Verfügung steht
BSP:
Azotobacter
Gartenerde und Mannitol als Kohlenstoff,- Energiequelle
Bei 30°C unter aeroben Bedingungen für 3-5 Tage unbewegt im Dunkeln inkubieren
Azotobacter setzt sich gegen Clostridium durch
(dieses bräuchte anaerobe Bedingungen)
Was ist Kahmhaut
Wo und wann war sie im Praktikum von Bedeutung
Biofilm an MO der sich an Grenzübergängen von Medium zu Luft ansammelt
-> Sauerstoffbedürftige MO
Praktikum
Heuaufguss zur Azotobakter-Anreicherung
Material aus Kahmhaut entnehmen und Tuschefärbung durchführen
Nennen sie ein aerobes, sporenbildendes Bakterium
Bacillus megaterium
Was ist ein Komplexmedium
Nennen sie ein typischen Bestandteil
Enthalten mind. eine chemisch nicht definierte Komponente
Häufig ein / mehrere Abbauprodukte nahrhaften tierischen / pflanzlichen Materials
-> Kasein
-> Blut
Organismenvielfalt kaum eingeschränkt
Was ist ein synthetisches Medium
Exakte definierte Mengen der (oft hoch gereinigter) Verbindungen
(Alle Massen,- Summenformeln der Komponenten bekannt)
Was ist ein Minimalmedium
Enthält minimale Nährstoffansprüche eines Organismus
Ist ein synthetisches Medium
Exakte definierte Mengen von (oft hoch gereinigter) Verbindungen
Organismenvielfalt eingeschränkt
Was ist ein Anreicherungsmedium
Im weiteren Sinne ALLE Medien
Herausfilterung von einem MO
aus einer Mischkultur
auf der Grundlage ihrer physiologischen Eigenschaften
Durchsetzen des bestangepassten Stoffwechseltyps
unter Konkurrenzbedingungen
-> Nährstoffangebot selektiert den Org.
Was ist ein Selektionsmedium
Herausfilterung eines MO aus einer Mischkultur
-> Durch gezielte Unterdrückung unerwünschter Begleitorganismen
-> Aktive Beeinflussung
BSP
“Pilzagar-Platte”
-> Saurer pH
-> Optimal für Hefen / Schimmelpilze / ..
Was ist ein Differentialmedium
Erlaubt Wachstum mehrerer MOS
So zsmgesetzt dass sich unterscheidbare Kolonien bilden
Was ist ein Antibiotikum
Nennen sie 2 Antibiotika und beschreiben sie deren Wirkmechanismus
Antimikrobielle Agenzien die (meist) natürlicherweise von MOs synthetisiert werden
Penicilline
Hemmt DNA-Gyrase
Definition
Antisepsis
Desinfektion
Sterilisation
Entfernung von Pathogenen von lebendem Gewebe
Klinik: Entfernung von Pathogenen
Abtötung allen Lebens
(Test: Abtötung von Endosporen)
Welche physikalischen / chemischen Umwelteinflüsse können Wachstum von Bakterien beeinflussen
Nennen sie 4
pH-Wert
Salzgehalt / Wasseraktivität
Temperatur
Sauerstoff
Nennen und beschreiben sie die 4 Phasen des Wachstums einer Bakterienkultur
Lag-Phase
Anlaufphase
Abhängig von Inkubationsbedingungen / Impfkulturgröße
Exponentielle Phase
Maximale Teilungsrate
Konstante Wachstumsrate
Stationäre Phase
Limitierung des Wachstum
Physiologie ändert sich (Stressbedingungen)
Lysis setzt ein
Zahlzahlzunahme ~ Absterberate
Absterbephase
Lysis überwiegt
Skizze Wachstumsphasen
Wie bewegen sich Bakterien
in Flüssigmedium
auf Oberflächen
Flüssigmedium
Geißeln
Oberflächen
Mithilfe Typ-IV-Pilus
Twitching mobility / Zuckbewegungen
Welche Bestandteile / Enzyme / Reaktionen einer bakteriellen Zelle eignen sich als Angriffsort für Antibiotika
Warum?
Je 2 BSP
Zellwandsynthese
DNA-Gyrase
Proteinsynthese
-> essentielle und universelle Besssandteile von Bakterien
-> effizienter Angriffsort
Wozu dienen Gasvesikel
Schnellere Beweglichkeit in Wassersäule
(Auftrieb)
Wozu dient Dipicolinsäure im Sporenkern
Verringert Wassergehalt
Stabilisiert DNA
In Endospore
-> dient der Thermoresistenz
Wie begegnen MOs der geringen Löslichkeit von Fe(III)
Aerobe Bakterien:
Siderophore
Eisenchelatoren
Niedermolekulare wasserlösliche Substanzen,
die mit hoher Spezifität und Affinität Fe(III) binden
Was sind Wachstumsfaktoren
Essentielle org. Moleküle und Verbindungen,
die durch den MO nicht synthetisiert werden können
und mit der Nahrung aus der Umgebung (dem Medium)
aufgenommen werden müssen
Vitamine
Aminosäuren
Purine
Pyrimidine
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