What is a biofilm?
Biofilms are architecturally complex, organized communities of sessile cells embedded within a matrix of self-produced extracullular polymeric substances
What are sessile cells?
Zellen die adhäsiv an eine oberfläche gebunden sind
Was ist die EPS?
Extracellular polymeric substances
—> Schicht die von Bakterien abgegben wird und sie als Matrix umhüllt
Ein paar Beispile wo Biofilme vorkommen
natürliche Oberflächen (Steine im Bach)
Lebensmittel (Vergammelt)
Zahnbelag
auf Lebewesen (Haut,…)
Implantate
Wo erfolgt die Nährstoffversorgung und Haftung bei einem untergetauchten Biofim (submerged Biofilm)?
feste Phase auf der die Anhaftung stattfindet (Agar, Steine, …)
wird von einer flüssigen Phase umspült die Nährstoffe und Sauerstoff enthält
Was sind die Schritt bei der Bildung eines Biofilms?
Attachment
Bakterien interagiern mit der Oberflläche mittels Pili, Flagellen, Adhäsionsproteine
Microcolony formation
Vermehrung zu einer Mikrokolonie
Maturation
ab einer gewissen Größe der Kolonie kommt es zur Reifung
structural consolidation —> Organisation des Biofilms was zu erhöhten Stabilität und Wiederstnadfähigkeit führt
Dissasembly
Auflösung des Biofilm durch verschiedene Ursachen (chemische Behandlung, mechanische Zerstörung, Degradierung durch Enzyme, … )
Was ist Adhesin?
sind Zelloberflächenbestandteile oder Anhängsel von Bakterien, die die Adhäsion oder das Anhaften an andere Zellen oder Oberflächen erleichtern, normalerweise in dem Wirt, den sie infizieren oder in dem sie leben. Adhäsine sind eine Art von Virulenzfaktor.
Welche Kategorien von Adheisinen (Attachement) gibt es? Beispiele und Funktion nennen!
Pre-formed adhesin:
Flagellum (kann ürsprüngliche Funktion ändern)
einziehbare Pili
—> lange Distanzen überbrücken, Abstoßungskräfte
Conditioned synthesized adhesins (Konditionierte synthetisierte Adhäsine)
LapA Protein
SabB Protein
PGA polysaccharide
—> Produktion nur wenn es notwendig ist
specific adhesins:
Invasin
Internalin
—> adhesive Rezeptor Interaktion (ehr bei pathogenen Arten, Substanzen sind schädlich)
Woraus setzt sich die EPS-Matrix zusammen?
Bakterien
Polysaccharide A und B
Proteine
Amyloide
eDNA
OMV (outer membrane vesicle)
Welche Aufgaben hat die EPS-Matrix?
sturkturelle Stabilität (Härte und Elastizität)
moduliert die 3D Struktur des Biofilms
Schutz für die Zellen
verhindert Dehydration
Filterfunktion für organische und anorgansiche Toxine von außen
——> Trägt zur Resitenz von Bakterien gegenüber Antibiotika bei
—> wirkt gegen Verteidigungsmechanismen des Wirts
Welche Wechselwirkungen zwischen den Atomen finden im Biofilm statt und was sorgt für die Stabilität?
elektrostatische Wechselwirkungne
Ionsiche Anziehungen
Abstoßungskräft
Wasserstoffbindung
van der Waals Kräfte
all diese Physiochemischen Interaktionen sorgen für Stabilität sowie für die Verflechtung von Biopolymeren
Ein paar Beispiele von Funktionen der extrazellulären Plolymerer Stoffe mit jeweiliger Relevanz und involvierter EPS Komponenten:
Funktion
Relevanz für den Biofilm
EPS Komponente
Adhesion
nitiation der Kolonisierung von berflächen und Anhaftung für längere Zeit
Polysaccharide, Proteine, DNA, amphiphilic molecules
Genaustausch
horizontaler Gentransfer
DNA
Nährstoffquelle
Stellt Kohlenstoff-, Stickstoff-, Phoshatquellen zur Verfügung
all EPS compounds
Welche Fähigkeiten besitzen Biofilme als Gemeinschaft?
lokalisierung von Gradienten die eine Diversität im Habiat bieten
Ressourchenbindung durch Sorption (Anreichurng eines Stoffes innerhalb einer Phase oder auf einer Grenzfläche=
Enzyme-Retention (Zurückhaltung) —> Externes Verdauungssystem
Soziale Interaktion —> Kooperation und Konkurenz
Antibiotikaresitenz/toleranz
Welche Arten von Gradienten können in einem Biofilm auftreten und was ist di Konsequnz daraus?
Sauerstoffgradient
oben ist mehr Sauerstoff als unten
Sauerstoff wird schneller Veraucht als die Diffusionsrate
oben Aerobe, mitte Fermentiere, unten Anaerobe Bakterien
Nähstoffgradient
oben metabolisch aktive Zellen
hungernde oder tote Zellen fallen nach unten
ph-Gradient
quorum sensing Gradient
—> das alles führt zu einer Biodiversität innerhalb des Biofilms
Was ist Quorum Sensing
Quorum Sensing ist die Regulation der Genexpression als Reaktion auf Schwankungen in der Zellpopulationsdichte. Quorum-Sensing-Bakterien produzieren und setzen chemische Signalmoleküle frei, die als Autoinduktoren bezeichnet werden und ihre Konzentration in Abhängigkeit von der Zelldichte erhöhen.
Welche drei Arten der Sozialen Interaktion gibt es in Biofilmen?
Kommunikation
Kooperation
Competition
Nenne ein Beispiel für Kooperation in einem Biofilm
Synergetischer Abbau von Linuron:
Linuron ist ein Toxin
alleinige Spzeies kann Zugabe von Linuron nicht überleben
leben drei Spezies zusammen (Comamonas testosteroni WDL7, Hyphomicrobium sulfonivorans WDL6, Variovorax sp. WDL1) wird die toxische Wirkung aufgehoben
Nenne Besipiele für Competition in einem Biofilm
Antibiotika
Bacteriocine (Toxine die Wachstum anderer Bakterien inhibiern
Killer-Vesikel
Biosurfactants (Biotenside) können Oberflächen zerstören
Inhibiern vom Quorum sensing
Nährstoffabbau
Wie können sich Resitenzen und Toleranzen gegenüber Antimicrobials entwickeln?
EPS kann die Aktivität von Antimicrobials unterdrücken/unvollständiges Eindringen des Antimicrobial in den Biofilm
Inhibieren von Diffusions-Reaktionen senkt die Konzentration von Antimicrobials auf subleatle Konzentraionen, was zum Überleben von einzelnen Zellen führt die dem Toxin ausgestzt waren und somit eine Resistenz entwickeln konnten
Metabolische Aktivität heruntersetzt wodurch die Anfälligkeit für Antimicrobials sinkt
Austausch von Resitenzgenen über horizontalen Gentransfer
Welche vier Arten von Biofilmen gibt es und woher kommt die Nährstoffzufuhr etc. ?
Welche vier Arten von Biofilmen gibt es? Nenne ein Beispiel in der Natur/Klinik/Industrie und eins im Labor!
Submerged biofilm
Biofilm auf einem Stein im Bach
beimpftes Medium in flowcells
Pellicle
Stehende Gewässer
microtiter wells
Subaerial Biofilm
Steine
beimpfte Mineraloberfläche in kontrollierter Atmosphäre
Macrocolony Biofilm
Erde/Boden
beimpfte nährstoffhaltige Agarplatten
In welchen zwei Lebensformen kann E. coli vorkommen?
motil durch Flagellen die eine motile einzellinge Lebensform ermöglichen
stationär durch Expression von Adhesinen, Amyloid-Curly-Fasern und anderne Exopolysacchariden (z.B. Zellulose) welche einen sesshafte und vielzellige Lebensweise ermöglichen
Wie verhalten sich die beiden Lebensformen “Motil” und “Adhäsiv” im zeitlichen Verlauf in einer Flüssigkultur?
Ordne
curli+cellulose
curli only
cellulose only
no cellulose/no curly
den folgenden Phänotypen zu
Woraus ist der Boden einer Makrokolonie geformt?
enges Geflecht aus verschlungenen Falgellen
Welcher second-messenger kontrolliert die Adhesion und Biofilbildung?
c-di-GMP
Welche drei Wachstumsphasen gibt es und wie unterscheiden sich bezüglich ihres c-di-GMP-Gehalts sowie den jeweils notwendigen Sigma-Faktoren?
Expotentielle Wachstumsphase
nicht motile Zellen
die meisten Ressourcen gehen in die Ribosomensynthese
Post-Expotentielle Phase:
Genexpression wird diverser
Zellen produzieren Flagellen —> FlhDC als Aktivator für flagilare Gene aktiv
σ70, σFLiA
niedriger c-di-GMP Gehalt
Stationäre Phase:
Zellen stoppen das Wachstum und werdne klein un eiförmig
Zellen werden Stressresistent
produzieren Curli-Fasern und Cellulose
σS
hoher c-di-GMP Gehalt
Welche Gene sind für die Postexpontentelle Phase und die Stationäre Phas wichtig?
Fasse nochmal die Eigenschaften der Zellen in der stationären und in der Post-Expotentiellen phase zusmamen
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