Nenne die 2 im Praktikum verwendeteten physiologische Test zur Charakterisierung von Bakterium!
-Zuckerverwertung unter Säurebildung
-Antibiotika Empfindlichkeit (sensitiv/Resistenz)
Auf welcher molekularen Grundlage beruht die Zuckerverwertung von Bakterien? (Spzifisch der von Glukose)
-Aufnahme von zucker durch die Bakterienmembran (Stichwort Permeabilität, Transportsystem) + Stoffwechselleistung
—>Glukose wird über Gruppentranslokation transportiert:
Schritt der Glykolyse: ATP+ Glukose —>Glukose 6-Phosphat
—>für Glukose Transport wird es phosphoryliert + so ins Cytoplasma transportiert
Warum entsteht Säure bei der Zuckerverwertung?
Bei großen Mengen von Zucker will das Bakterium den Zucker schnell aufnehmen + verstoffwechseln
—>Citratzyklus kann aber nicht rechtzeitig genug NAD+ regenerieren für Glykolyse, deswegen erlahmt diese
—>um das zu entgehen wird ein Teil des Pyruvat zu Lactat umgewandelt (NAD+ Regeneration) d. H. es entsteht Milchsäure
Kann z. B. sein wenn O2 limitierend ist (Teil der Atmungskette) oder bei Nahrungsmittelkonkurrenz
Nenne die 3 wichtigsten Antibitotika die im Praktikum verwendet wurden, deren angriffspunkte + mögliche Mutationen die Resistenzen gegen diese Antibiotika bewirken können
Penicillin
Transpeptidase Hemmer (Angriff Zellwandsynthese)
Mutation in Transpeptidase, Enzym ß-Lactamase zum Abbau von Penicillin, Effluxpumpen (Herauspumpen von Antibiotika)
Nalidixinsäure
Gyrase Hemmer (DNA Replikation)
Mutation in Gyrase
Kanamycin
Hemmung der Proteinbiosnthese an der ribosomalen 30S UE
Resistenz durch Enzym/phosphorylierung von Kanamycin
Detaillierte Wirkung von Penicillin bei gram positiven Bakterien
-um die Peptidoglykanschicht von gram positiven Bakterien aufrecht zu erhalten müssen diese ständig erweitert werden!
Aufbrechung peptidbrücken an Saccharidbrücken
Einsetzen von Murein + Glucosamin, erneutes Crosslinken durch Transpeptidase
Penicillin hemmt mithilfe seines ß-lactamase Rings die Transpeptidasen am aktiven Zentrum
Warum wirkt Penicillin bei gram negativen Bakterien nicht? Wie kann Wirkung erzeugt werden?
Gram negative Bakterien haben 2 Zellmembranen, die Periplasma schützen vor dem Eindringen von Penicillin
—>Penicillin ist außerden hydrophob, d. h. es kann nicht durch die hydrophile LPS Schicht durchdringen
—>Kann beeinflusst werden indem Penicillin weniger hyrophob gemacht wird, Derivat kann sogar durch äußere Zellmembran dringen!
Wir können bakterielle Resistenzen entstehen?
Mutation im Zielgen (Verhindert Bindung Antibiotikum)
Enzyme, die Antibiotikum inaktiviert
Effluxpumpen (Auspumpen Antibiotikum aus Zelle)
2 Arten der Bestimmung der Vermehrungsrate
Neubauer Zählkammer
Messung optische Dichte am Photometer (Unterscheidet nicht zwischen lebenden und abgestorbenen Zellen!), optische Dichte korreliert mit Anzahl der Bakterien bzw. lichtstreuung zur Zellkonzentrationen
Phasen der Bakteriumvermehrung + kurze Erläuterung
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