Verfassen Sie eine kurze, allgemeine Definition für Chromatographie.
Verfahren zur Auftrennung von Stoffgemischen durch unterschiedliche Interaktionen der Einzelsubstanzen mit einer mobilen und stationären Phase.
Nennen Sie drei verschiedene chromatographische Trennprinzipien und erläutern Sie diese kurz etwas genauer.
Adsorptionschromatographie
Verteilungschromatographie
Ionenaustauschchromatographie
Größenaustauschchromatographie
Affinitätschromatographie
Definieren Sie, was ein Chromatogramm ist und erklären Sie den Unterschied zwischen einem inneren und einem äußeren Chromatogramm. Erklären Sie in diesem zusammenhang auch, was Fronting und Tailing ist und nennen Sie zwei mögliche Ursachen.
Ein Chromatogramm ist die graphische Auswertung eines chromatographischen Versuchs.
Inneres Chromatogramm bei DC, wo die Auswertung gleich auf der Platte/stationären Phase erfolgt
Äußeres Chromatogramm wenn am Ende von Chromatographie System ein Detektor ist der Signale für Auswertung aufzeichnet und umwandelt
Fronting/Tailing: Peakform nicht symmetrisch, bei fronting Peakanstieg breiter, bei Tailing Peakabfall breiter; Ursachen: instrumentelle Fehler, schlechte Gleichgewichtseinstellung
Bennenen Sie das Acronym und nennen Sie die essentiellen Bestandteile einer HPLC-Anlage.
high Performance/Pressure liquid Chromatography
Bauteile: Entgaser, Pumpe, Injektor, Autosampler, Säulen, Detektor
Nennen Si ezwei gebräuchliche Anwendungen für die HPLC.
Reinheitsprüfung
Identifizierung
Quantifizierung
Sie vermessen eine Tablette mit der HPLC und erhalten ihr Ergebnis in Form eines Chromatogramms. Wie können Sie mit Hilfe von Referenzen qualitative und quantitative Aussagen zu Ihrer gemessenen Tablette machen?
qualitativ:
Referenzen mit bekannten Arzneistoffen zeigen retentionszeiten für Arzneistoffe, Abgleichen der Retentionszeit der Probe bei gleicher Messung
quantitativ:
Referenzen mit bekannten Arzneistoffen zu verschiedenen Konzentrationen messen, mit Fläche unter Peaks Kalibriergerade erstellen, Abgleichen der Fläche der Probe bei gleichen Messbedingungen
Wenn Sie an die Säule einen Detektor anxhließen, können die Ergebnisse in einem Chromatogramm dargestellt werden. Beschriften Sie die unten stehenden Achsen im Chromatogramm und die Werte 1, 2 und 3.
1: Totzeit/Durchlaufszeit
2: Bruttoretentionszeit
3: Nettoretentionszeit
y-Achse: Signalhöhe
x-Achse: Zeit
Nennen Sie vier chromatographisch Trennprinzipien, wovon Sie zwei genauer beschreiben.
Adsorption: “hängenbleiben” an Oberfläche aufgrunf WW in z.B. Polarität
Größenausschluss: kleinere Moleküle gehen in Poren der SP und brauchen länger als große
Affinität: wie Enzym-Substrat Interaktion
Ionenaustausch: Festionen bindne reversibel mit Gegenionen in Probe
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