Schubert

CHO-Zellen:

• immortalisierte Zelllinie aus Ovarien des chinesichen Zwerghamsters

• stabil bei 30-37 °C

• CO2 benötigt

• adhärent oder in Suspension

• robustes Wachstum

• erfüllen regulatorische bedingungen

• sehr ähnliche posttranslationale Modifikationen

• Speziesgrenze -> evtl. kontamanitationen unwahrscheinclicher

• gut etabliert

• hohe Ausbeute (da sehr gut optimiert)

• Genom sehr stark verändert zum Original

BHK-Zellen: Baby Hamster Kidney Zellen

Ursprung: B-Zelllinie (Myeoloma) Maus

• adhärent oder Suspension

• sterben in HAT-Medium ohne Fusion -> Fusion mit B-Zellen ist notwendig zum Immortalisieren

• Hybridomabildung spezifisch gegen bestimmtes Antigen

= Human embryonic kidney cells

• immortalisiert durch integration zerschnittener Adenovirus 5 DNA

• isoliert aus weiblichem Fötus 1972

• stabil bei 32-37 °C

• benötigt CO2

• adhärent und in Suspension

• robustes Wachtsum

• erfüllen regulatorische Bedingung (aber anfälliger für Virus Kontaminationen)

• sehr menschennahe PTMs

• gut etabliert

• hohe Ausbeute

• stabile & transiente Systeme bekannt

a) Epstein-Barr Nuclear Antigen (EBNA)

-> bindet an oriPlasmid und verankert Plasmid im Chromatin (haltbar ca. 3 Monate)

b) Large-T-System (Achtung: onkogen)

-> auch Episom-System; Large T bindet an SV40Ori und sorgt für Replikation, bei HEK293T stabil ins Genom integriert

• piggyBac-Transposon

  -> Cut und Paste, deutlich effizientere Integration, Cargo bleibt intakt und kann groß sein (200kbp)

• andere Transposonsysteme

• CRISPR/Cas9