Vorlesung 9

HUS-relevante Stx2a zu verschiedenen Zeitpunkten der CD34+ HSPC in vitro-Kulturen in aufsteigender Konzentration zugegeben

Verlust an Zellviabilität in Abhängigkeit vom Zeitpunkt der Toxinzugabe und eingesetzten Toxinkonzentration

größte Konzentration zeigte auch größte schädigende Wirkung

an Tag 0 beide nicht detektierbar

ab Tag 4 nachweisbar, steigt bis Tag 8

schrittweise Abnahme an Tag 11 und 15

auf Zellen wesentlich mehr Gb4Cer als Gb3Cer

Stx wirkt umgekehrt wie EPO -> Epo fördert Bildung von Erythrozyten, Stx inhibiert sie

erklärt den Verlust an Erythrozyten und daraus resultierenden hohen Bedarf an Bluttransfusionen von HUS-Patienten

Harnwegsinfektionen, häufigste diagnostizierte Nieren- und Harnwegserkrankungen des Menschen

UPEC-Infektionen verursachen zu 80% unkomolizierte Harnwegsinfektionen bei ansonsten gesunden Individuen, mehrheitlich Frauen

binden über ihre P-Fimbrien, bzw. PapG-Adhäsin an Urothelzellen des Harntraktes

Rezeptoren des PapG-Adhäsins sind neutrale GSL der Globo-Serie -> Gb3Cer und Gb4Cer

ambulant erworben (natürliche) 60-80%

nosokomial erworben (im Krankenhaus) 30-40%

Besiedelung der Harnröhre (Urethra)

Blasenentzündung (Zystitis)

Aufstieg über den Harnleiter (Ureter)

akute Nierenbeckenentzündung

Blutvergiftung (Urosepsis)

-> UPEC adhärieren an Rezeptoren des Uroepithels (=Gesamtheit der Epithelzellen der Niere und des harnableitenden System)

Adhäsine an den Fimbrienspitzen, mit denen UPEC an Glykane der Zielzelle binden -> PapG-Adhäsin der P-Fimbrien und FimH-Adhäsin der Typ 1-Fimbrien

drei Varianten von PapG -> PapG I, PapG II, PapG III, binden im unterschiedlichen Ausmaß an Gb3Cer und Gb4Cer

Typ 1-Fimbrien adhärieren aussschließlich an high-mannose Strukturen

in Säugern keine GSL mit high-mannose Strukturen, aber auf humanen Epithelzellen des Harntraktes Membranprotein Uroplakin als Rezeptor, an dessen high mannose-Glykane das FimH-Adhäsin bindet i

Bakterien biotinyliert -> mit Biotin markiert

dabei aber “Unterbiotinylierung” und “Überbiotinylierung", aber dennoch genügend Biotinmoleküle, damit gebundene Bakterien nachgewiesen werden können

Nachweis mit Neutravidin (neuere Variante von Streptavidin), das mit alkalischer Phosphatase gekoppelt ist, BCIP als Substrat

ein PapG I-produzierender E.coli-Stamm zeigt ausgewogene Bindung an Gb3Cer und Gb4Cer

zwei PapG II-produzierende Stämme zeigen Trend zur bevorzugten Erkennung von Gb4Cer ggü. Gb3Cer

dies noch verstärkt bei PapG III-produzierenden Stämmen

binden noch besser an Forssman-GSL, dieses aber nicht im Menschen vorhanden, extended globoseries GSLs aber “bessere” Rezeptoren für analysierten PapG-exprimierende E.coli-Stämme als Ausgangsstrukturen Gb3Cer und Gb4Cer -> Verlängerung der Zuckerkette wirkt sich positiv auf bakterielles Adhäsionsvermögen aus