Analytik

1. Frisch-und Trockenmasse

2. direkte Methoden

   Gesamtstickstoffgehalt, Gesamtkohlenstoffgehalt

   Zellproteinbestimmung (Biuret-, Bradford-, Lowry-Methode)

3. indirekte Methoden

   Optische Dichte

   Stoffwechselgrößen die direkt mit Wachstum zusammenhängen (titrimetisch, manometrisch, elektrochemisch u.a.)

1. Gesamtzellzahlbestimmung:

   • Mikroskopische Zählung: auf Neubauer-Zählkammer ausgebreitet und die Zellen in mehreren Quadraten gezählt ->Gesamtzellzahl pro Volumeneinheit berechnen.

   • Spektrophotometrische Methode: Diese Methode misst die Trübung (OD - Optical Density) der Kultur in einem Spektrophotometer. Je mehr Zellen vorhanden sind, desto trüber ist die Kultur

2. Lebendzellzahlbestimmung:

   • Plattenverdünnung und Koloniezählung: Die Kultur wird in einer Reihe von Verdünnungen hergestellt und dann auf feste Nährböden ausgeplättet. Nach der Inkubation zählt man die Zahl der Kolonien (jede davon repräsentiert eine ursprüngliche lebende Zelle) und berechnet dann die Lebendzellzahl pro Volumeneinheit.

   • Lebensfähige Zählungen mit Fluoreszenz: Hierbei werden fluoreszierende Farbstoffe verwendet, die lebende und tote Zellen unterscheiden können, basierend auf der Integrität ihrer Zellmembranen. Diese Methode wird oft mit Durchflusszytometrie kombiniert, um einzelne Zellen zu zählen und zu klassifizieren.

MacConkey-Agar, der Lactose und Neutralrot enthält. Lactosefermentierende Bakterien führen zu einer Absenkung des pH-Wertes und die Kolonien werden rot gefärbt, während nicht Lactosefermentierer farblose oder transparente Kolonien erzeugen.

hemmt das Schwärmen von Proteus-Stämmen ; Kristallviolett unterdrückt das Wachstum von grampositiven Bakterien

oder Kochsalz-Mannit Agar, fördert Staühylokokken

unterschiedliche Arten oder Klassen von Organismen auf der Basis von physiologischen Unterschieden zu unterscheiden. Ein Beispiel ist der Eosin-Methylenblau-Agar (EMB), der zur Differenzierung zwischen Lactose fermentierenden und nicht fermentierenden Gram-negativen Bakterien verwendet wird.

• (Kolonie-) form, farbe, geruch

• Pigmentbildung

• Färbevrhalten

• Kapsel/Sporenbildung

• Beweglichkeit

• Katalase-Test: Dieser Test dient zur Identifizierung von Organismen, die Wasserstoffperoxid in Wasser und Sauerstoff umwandeln können, eine Reaktion, die durch das Enzym Katalase katalysiert wird.

• Oxidase-Test: Dieser Test identifiziert Organismen, die bestimmte Arten von Atmungsenzymen, bekannt als Cytochrom c Oxidasen, haben.

• Urease-Test: Dieser Test identifiziert Organismen, die das Enzym Urease produzieren, das Harnstoff in Ammoniak und Kohlendioxid zerlegt.

• ONPG-Test: Der ONPG-Test identifiziert Organismen, die die Fähigkeit besitzen, ß-Galactosidase zu produzieren und somit ONPG (O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranosid) zu hydrolysieren.

• zellwandaufbau

• antigenstruktur

• DNA, rRNA

• Proteine, Peptide

1. Kokken:

   Streptokokken (Ketten), staphylokokken (cluster), diplokokken (2er paare), neisserien (paarweise ovale), sarcinen (4er paare)

2. Stäbchen:

   spitze enden, eckige Enden, schlank, plump, kokkoid, fädig

3. gewundene Stäbchen

   Vibrionen (Sicheln), Spirillen, Spirochaeten (längere)

KOH:

Gram-Differenzierung-> nach behandlung mit 0,5M KOH chromosomale DNA als Faden=> Gram Negativ

KAtalase:

enzymaktivität, zur Identifizierung von Staphylokken (positiv) und Streptokokken (negativ)=> sprudel=positiv

Oxidase: differenzierung von Enterobakterien zu nicht-Enterobakterien durch Nachweis Cytochromoxidase

Oxidase positiv-> blau

mikrobiologisches Verfahren zur Unterscheidung E.coli von anderen Enterobacteriaceen

1. I - Indol-Test: prüft FähigkeitTryptophan zu Indol abzubauen. Der Test ist positiv, wenn eine rote Farbe nach Zugabe von Kovac's oder Ehrlich's Reagenz auftritt.

2. M - Methylrot-Test: fähigkeit, gemischte Säuren bei der Fermentation von Glucose zu produzieren, die bei Zugabe von Methylrot-Ph-Indikator zu einer roten Farbe führen. Ein positives Ergebnis ist rot, ein negatives Ergebnis ist gelb.

3. V - Voges-Proskauer-Test: prüft Fähigkeit, Acetoin (einen Vorläufer von 2,3-Butandiol) bei der Glucosefermentation zu produzieren. Ein positives Ergebnis ist eine rötliche Farbe nach der Zugabe von VP1 (alpha-Naphthol) und VP2 (Kaliumhydroxid).

4. i- füllbuchstabe zur aussprache

5. C - Citrat-Test: prüft die Fähigkeit, Citrat als einzige Kohlenstoffquelle zu verwenden, was durch ein spezielles Medium namens Simmons Citrat-Agar überprüft wird. Ein positives Ergebnis ist eine blaue Farbe auf dem Agar, was auf einen pH-Anstieg durch Citrat-Verbrauch hindeutet.

E.coli: ++-- , Enterobacter aerogenes: -- ++