PCR

Polymerase Kettenreaktion

Labormethode, um gewünschte DNA - Abschnitte zu vervielfältigen

Zutaten:

• Eine bekannte doppelsträngige DNA-Vorlage

• Zwei kurze, künstliche Primer

• Viele freie Nukleotide

• hitzestabile DNA Polymerase

• pufferlösung

• Thermocycler

Reaktionsgefäß mit den Zutaten im Thermocycler auf circa 90 Grad Celsius erhitzt

Durch diese Temperaturen trennen sich die Wasserstoffbrücken -> aus dem DNA Doppelstrang entstehen zwei DNA Einzelstränge

Reaktionsgemisch wird auf circa 50-65 Grad abgekühlt

Jetzt können die Primer an die jeweiligen Vorlagestränge binden

Erneute Temperaturerhöhung (ca 70 Grad)

Das Enzym DNA Polymerase beginnt mit ihrer Arbeit

Am 3’ Ende der Primer werden die passenden, zugegebenen Nukleotidbausteine anzulagern und zu verknüpfen -> erhalten zum Vorlagestrang komplementäre DNA Sequenz

Am ende der Elongationsphase fangen wir wieder bei Schritt 1 an -> ermöglichung der Vervielfältigung