Part 1 - basics & Definitions

Villi (Ausstülpungen) Krypten (Einstülpungen

1. lineage Tracing

2. kompetetiver wiederbesiedlungstest

3. Klogene Assays mit serieller Passage/Transplantation

inaktiv:

1. Konzentration von β-Catenin wird niedrig gehalten. -> durch Abbau -> erfolgt durch Zerstörungskomplex.

   besteht aus mehreren Untereinheiten:

   Axin -> Ein Gerüstprotein, das Komponenten des Zerstörungskomplexes zusammenbringt & die Phosphorylierung von ß-Catenin vermittelt

   CK1α (Casein Kinase 1α) -> Ein Enzym.

   GSK3β (Glykogen-Synthase-Kinase 3β) -> Ein Enzym.

   CK1α und GSK3β: verantwortlich für die Phosphorylierung von β-Catenin:

2. Phosphoryliertes β-Catenin wird von β-transducin repeat-containing protein (βTRCP) erkannt,

   -> eine Komponente des E3-Ubiquitin-Ligase-Komplexes (SCF-ßTRCP)

3. Führt zur Ubiquitinierung und zum anschließenden proteasomalen Abbau von β-Catenin.

Aktive Phase:

1. aktives Wnt wird von einer benachbarten Zelle über einen Cargo-Rezeptor freigesetzt.

2. Wenn extrazelluläres WNT an FRIZZLED & Co-Rezeptor LRP 5/6 bindet

   -> wird LRP5/6 phosphoryliert,

3. Rekrutierung von Zerstörungskomplex (bzw. Axin) an Plasmamembran

   = Destabilisierung des Zerstörungskomplexes

4. Zusätzlich wird Dishevelled (Dvl) rekrutiert

   -> ein Gerüstprotein = hemmt den Zerstörungskomplex.

5. Führt zu anreicherung β-Catenin im Zytoplasma

   -> erhöhte ß-cat level = transport β-Cat in Zellkern

6. Bildet Komplex mit TCF/LEF

   (T-cell factor/lymphoid enhancer factor)

7. Komplex aktiviert Expression von Zielgenen

   -> wichtig für Differenzierung & Proliferation

   -> Z.b Cyclin D1 und MYC, die die Zellproliferation regulieren.

durch R-spondine

Bindung von R-Spondin fördert Endozytose des LGR4/5/6-RNF43/ZNFR3-Komplexes

Erklärung:

1. RNF43/ZNFR3 sind E3-Ubiquitin-Ligasen die FRIZZLED herunterregulieren

   -> Verminderte Zelloberflächenspiegel des RNF43/ZNFR3

   = erhöhte Frizzled-Spiegel

   = erhöhte Wnt-β-Catenin-Signalaktivität

2. LGR4/5/6 wird in Zellen exprimiert mit hohen level an WNT signal aktivität

3. R-Spondine sind sezernierte Glykoproteine, die mit

   mit LGR4/5/6 und RNF43/ZNFR3 an der Zelloberfläche interagieren.

Eselsbrücke: LRP (FZD Co-Rezeptor) = low density lipoprotein rezeptor related protein

LGR = leucin rich repeat containing G-Protein coupled rezeptor

Das Modell erklärt, dass Zellen an verschiedenen Positionen entlang des Gradienten unterschiedlich auf die Konzentration des Morphogens reagieren und sich in unterschiedliche Zelltypen differenzieren.

-> Ein Morphogen wird in best. Bereich produziert & breitet sich in einem Gradienten aus (Konz. d. Moleküls ist an versch. Positionen im Gewebe unterschiedl.)

-> der Morphogen-Gradient = entlang einer Achse

-> Zellen reagieren je nach Morphogen Konzentration

(= Zellen reagieren je nach ihrer Position im Gradienten unterschiedlich)

-> und differenzieren sich in verschiedene Zelltypen.

1. durch Diphtherietoxin Rezeptor (HB-EGT)

2. Thymidinkinase (HSV) & Ganciclovir

3. Caspase-9 & AP20187