häma pr II

· Maligne Erkrankung der hämatologischen Stammzellen

· Autonome Proliferation einer Leukozytenpopulation myeloischer/lymphatischer Herkunft mit Ausschwemmung unreifzelliger Blasten ins Blut (=spezifisch)

WHO: ab 20% Blasten, nach FAB Klassifikation ab 30% Blasten im Blut

· Akut, plötzlicher Beginn

· Ausbreitung der Leukämiezellen im KM àVersagen der normalen Hämatopoese

· Infektbereitschaft erhöht durch Verminderung reifer, funktionstüchtiger Leukozyten

· Blutungsbereitschaft (Verminderung Thrombos und Gerinnungsfaktoren)

Anämiesymptome: Blässe, Dyspnoe, Müdigkeit, Allgemeine Symptome: B-Symptomatik(B= Begleit), Gewichtsverlust, Fieber, Nachtschweiß

· Leukozytenanzahl kann normal, erhöht, erniedrigt sein

· Thrombozytenanzahl vermindert

Anämie

· Ab 20% Blasten im peripheren Blut

· Hiatus leucaemicus: Vorkommen von unreifen (Blasten, Promys) und reifen (Stab-/Segmentkernige), halbreife Zellen (Myelozyten, Metamyelozyten) fehlen /sind vermindert

Auerstäbchen können vorkommen

· Ab 20% Blasten

· Erythropoetische Vorstufen, reife Leukos und Megakaryos erniedrigt

· Hyperzellulär

Bis zur Differenzierung der Blasten spricht man zusammenfassend von AL ohne genaue Angabe der Blastenzuordnung

· BSG stark beschleunigt àwenige Erys= weniger Abstoßung

· Fe im Serum erniedrigt im Falle von Infekten ( durch Verbrauch)

· Bei LeberbeteiligungàLeberenzyme erhöht

· Akute Phase Proteine im Serum erhöht

LDH erhöht (Zellumsatz)

· Maligne Erkrankung der pluripotenten Stammzelle

· Langsamer, schleichender Verlauf

· Exzessiv funktionstüchtige Granulozyten

· Vorkommen aller granulozytärer Vorstufen

Philadelphiachromosom positiv

· Schleichender Beginn

· Milzvergrößerung

· B-symptomatik

· Anämie-Symptomatik

· Infektbereitschaft/Immunschwäche

· Blutungen später

Leukämisches Fieber

· Leukozytose schwankend

· Anämie im Verlauf der Erkrankung

Thrombozytose zu Beginn/ später Thrombopenie

· Maligne pathologische LV à zu MPN eingeteilt

· Basophilen+ Eosinophilen Erhöhung typisch

Im Verlauf 80% Patient*innen Blastenschub

· Hyperplasie

· Vermehrung granulopoetischer Vorstufen

· Erythropoetische Zellen ↓

· Megakaryozyten zu Beginn ↑, später↓

· Basophile+ Eosinophile ↑(möglich)

Übrige Leukozyten ↓

· Auffällige Veränderung an den Chromosomen

· BSG beschleunigt

· Akute- Phase Proteine im Serum ↑

· LDH ↑ (Zellumsatz)

UA ↑ (Harnsäure)

spezifisch

· Alkalische Leukozytenphosphatase (ALP) stark ↓/ vollständig fehlend (<3%)

Nachweis Philadelphia Chromosom= Chromosomenaberation-Translokation der Chromosomen 22+ 9

· B-Zell-NHL mit KM-Infiltration durch Klon einer malignen transformierten Plasmazelle (B-zelle)

Bilden Ig eines einzigen Idiotypen = monoklonale Gammopathie(IgG, IgA, IgD) oder/und Leichtketten (kappa oder lambda)

· Schleichender Beginn

· Allgemeines Schwächegefühl

· Blutungen, Petechien (Thrombopenie)

· Gehäufte Infekte durch AK-Mangelsyndrom und Leukopenie

· Neurologische Symptome (Kopfschmerzen, haupts. Durch sehr hohe Leichtkettenwerte im Serum)

· Nierenfunktionsstörung durch hohe Eiweißbelastung

Osteolytische Herde:durch Stimulation der Osteoklasten und Hemmung der Schädelknochen und anderer Knochen)

· Anämie

· Leukozyten oft vermindert

· Thrombopenie

Panzytopenie durch Verdrängugn der Blutbildung im KM

· Ab 20% Plasmazellen (ab 10% PLZ+ Nebenbefund)

· Erythropoese vermindert

· Thrombopoese vermindert

· Granulopoese vermindert

Hyperplasie

BSG extrem beschleunigt-> Sturzsenkung

Gesamteiweiß erhöht

Ak-Mangel-Syndrom

Calcium+Phosphat erhöht

Monoklonale Gammopathie

Bence-Jones Moleküle evtl

• Niedrig malignes NHL

• Erkrankung des lymphatischen Gewebes →Vermehrung der reifen B-Lymphozyten im peripheren Blut und einer abnormen Wucherung lymphatischer Zellen

• Im KM >30% Lymphozyten

• Schleichender Beginn

• LK-Schwellungen

• Meist kleine Milzschwellung

• Lebervergrößerung

• Leukämische Hautinfiltrate, lymphatische Erythrodermie Hautjucken

• Blutungsneigung 8Thrombopenie)

• Immunschwäche (Ig-produktion verlangsamt bis zum AK-Mangel Syndrom)

• Anämie Symptomatik

• Leukozyten erhöht schwankend

• Anämie

• Thromozyten im Verlauf vermindert

• Relative Lymphozytose (bis auf evtl. 98%)

• Gumprecht-Kernschatten: typisch auftretende zerstörte Lymphozyten (Kernchromatin)

• Lymphozyten haben veränderte , sehr dünne Zytoplasmaschicht die beim Ausstreichen sehr leicht reißt

• 30% Lymphozyten

• Megakaryozyten vermindert

• Erythropoese vermindert

• Granulopoese vermindert

• Hyperplasie

• Hypogammaglobulinämie bis zum AK-Mangelsyndrom

• Wenn AK vorhanden → Coombstest positiv (irreguläre AK)

• BSG erst normal, später stark beschleunigt (irreguläre AK)

• Akute Phase Proteine im Serum erhöht

• LDH erhöht (Zellumsatz)

• Transformation in sekundär hochmalignes NHL mit ungünstiger Prognose=Richter Syndrom in 5% der Fälle

• Auftreten von Zweitmalignomen

• Nachweis B-CLL- Immunophänotyp (CD 19,20, 23)

• Zytogenetik: >89% haben chromosomale Veränderungen

·       5x16 Quadrate , L-förmig

Summe der Gruppenquadrate x 10 000

·       Falsche Verdünnung

·       Mischzeit nicht eingehalten

·       Blutprobe nicht gemischt

·       Zählkammer nicht komplett gefüllt

·       L-Form nicht beachtet

·       Falsche Quadrate

Verrechnung

Patientenprobe wird mit Hayem’scher Lösung 1:200 verdünnt, Erys fixiert und an Aggregation gehindert, andere Zellen werden lysiert

• mikroskop köhlern

• Neubauer-Zählkammer vorbereiten (reinigen, Deckgläschen aufbringen)

• Neubauer-Zählkammer in Mikroskop einspannen (40er, Frontlinse aus Strahlengang, Kondensor gesenkt)

• Blutprobe mit Pipette mischen

Zu beachten: Proben in 2 Schritten verdünnen

1) 20μl Patientenprobe+180μl Hayem’sche Lösung in Eppendorfhütchen pippetieren + vermischen

2) 40μl aus 1. Verdünnung+ 760 μl Hayem’scher Lösung in eppi ( 5 min schütteln) Zellkammer füllen

kurz sedimentieren lassen, zählen+ berechnen

Entsorgung in entsprechenden Behälter

Frauen: 4,2 Mio-5,4 Mio/μl

Männer: 4,6 Mio- 6,2 Mio/μl

• Reizpolyglobulie durch Sauerstoffmangek (Höhentraining, Lungenerkrankungen)

• manche Nierenerkrankungen

• KM Erkrankungen

• Polyzythämie vera

• KM-Erkrankungen (Leukämien)

• Schädigung KM durch Bestrahlung/Zytostatika

• starker Blutverlust

• vorzeitige Hämolyse

• Fehlen vo nAufbaustoffen wie Eisen oder Folsäure

·       Elektromechanisches Gerinnungserkennungssystem

·       Gerinnungsansatz in einer schräg gelagerten Küvette + Edelstahlkugel

·       Küvette dreht sich um eigene Achse, Kugel bleibt durch Schwerkraft immer am niedrigsten Punkt

·       Nach Zugabe des Startreagenzes startet Zeitzähler

Bei Gerinnungseintritt: Kugel wird durch entstehende Fibrinfäden mitgezogen àPositionsänderung: Impuls an Magnetsensor, Zeitzähler stoppt automatisch

·       Beheizte Station im Gerät, erst wenn 37° erreicht sind kann Messung beginnen

·       Koagulometer mind. 10 min vor Messung einschalten

·       Kontrolllämpchen grün. Soll-Temperatur erreicht

Rot: keine Messung

[1] INR= Internationale normalisierte Ratio

·* Nach der Inkubation von Citratplasma mit Gewebethromboplastin und Ca+-Ionen wird die Zeit bis zur Fibrinbildung gemessen

• V.a. Störungen in exogenen Weg

• Überwachung einer THerapie mit Vitamin K-Antagonisten (Marcumar)

• V.a. Leberfunktionsstörungen

• Prä-Op

• Mangel an Gerinnungsfaktoren des exogenen Weges

• Antikoagulanzientherapie Vitamin-K- Antagonisten (Marcumar)

70-130%

• 37°C nicht eingehalten

• Reagenz nicht richtig vorgemischt

• Luftblasen in Küvette

• spezielles Reagenz nicht ausreichend gemischt

• unspezifisch: Metallkugel mit Finger berührt

• Nach der Inkubation von Citratplasma mit einem Oberflächenaktivator, partiellen Thromboplastinen und Ca-Ionen wird die Zeit bis zur Fibrinbildung gemessen

• Überwachung einer Heparintherapie

• V.a. Störungen im endogenen Gerinnungssystem

• Prä-OP

• Heparintherapie

• Mangel am Gerinnungsfaktoren des endogenen Weges

• Hemmkörperhämophilie

• Prä-OP

25-38 s

• 37°C nicht eingehalten

• Reagenz nicht richtig vorgewärmt

• Luftblasen in Küvette

• Metallkugel mit Finger berührt

•       Lyophilisiertes Test-Thrombin-Reagenz mit 5 ml DIluent lösen

•       Mischen

•       1 min stehen lassen

•       Nochmal mischen

Vor Bestimmmung auf 37° erwärmen

•   •       Test-Thrombin wandelt das in der Probe enthaltene Fibrinogen in Fibrin um →Gerinnsel entsteht

Zeit bis zur Gerinnselbildung wird gemessen

Citratplasma →100 µl

60 sek inkubieren

Test-Thrombin-Reagenz →200 µl

14-21s

·        Hemmung der Fibrinbildung durch Heparin oder Hirudin

·        Angeborene oder erworbene Dysfibrinogenämie

·        Schwere Hypo- oder Afribrinogenämie

Physiologisch bei Neugeborenen

allg

• 37°C nicht eingehalten, Gerät nicht vorgewärmt

• Reagenz nicht vorgewärmt

• Luftblasen in Küvette

• Metallkugelm mit Fingern berührt

spezifisch

• Reagenz mit A.D. oder NaCl gelöst

• Reagenz nicht ausreichend gemischt

70-150%

Hämophilie A

• nach Zugabe von Thrombozyten+ Rsitocetin zur Patientenprobe kommt es zur Agglutination der Thrombozyten

• der Titer beiden bei dem es zu einer sichtbaren Agglutination kommt, ist abhängig von der vWF-Konzentration

von Willebrand(-Jürgens) Syndrom

vWS

70%-150%

• Inkubationszeit nicht eingehalten

• unsaubere GLasplatte

• 1 Rührstäbchen für alles verwendet

• schwenken vergessen

• falsche Nachweisgrenze

• je 50 μl Probenverdünnung+ 50 μl Reagenz auf Testfeld pipettieren, mit Rührstäbchen gleichmäßig vermischen

• 3 min schwenken

• 3 min stehen lassen

• nochmals kurz schwenken und Titer evtl vor dunklem HG ablesen

Patientenprobe wird mit Hayem’scher Lösung 1:200 verdünnt

Erys werden fixiert und an einer Aggregation gehindert, alle anderen Zellen werden lysiert.

Enthält giftiges Quecksilber

Blutprobe mischen

• Blutprobe in 2 Schritten verdünnen:1.) 20ul Patientenprobe +

180 ul Hayem'sche Lösung

in ein Eppendorfhütchen

pipettieren und vorsichtig mischen

• 2.) 40ul aus der 1.Verdünnung + 760 ul Hayem'sche Lösung in ein Eppendorfhütchen pipetterien

• 5 min. schütteln, Zählkammer füllen,

• kurz sedimentieren lassen, zählen und berechnen

• Entsorgung in entsprechende Behälter.

Mikroskop köhlern

• Neubauer-Zählkammer vorbereiten (=reinigen, Deckgläschen aufbringen)

• Neubauer-Zählkammer im Mikroskop einstellen: mit 40er Objektiv, Frontlinse aus dem Strahlengang und Kondensor gesenkt

• 5 Gruppenquadrate in L-Form meanderförmig

Probe nicht geschüttelt, Pipettierfehler

• Inkubationszeit nicht eingehalten

• Nicht sedimentieren lassen, Schmutz in Kammer

• Zählfehler (falsches Quadrat), falsches Objektiv

• Berechnungsfehler

Frauen: 4,2 Mio - 5,4 Mio/ul

Männer:4,6 Mio - 6,2 Mio/fl

sog. Reizpolyglobulie: durch Sauerstoffmangel, z.B. Aufenthalt im Gebirge, Lungenerkrankungen,

• bei manchen Nierenerkrankungen

• Erkrankungen des Knochenmarks

• Polyzythämie vera

Erkrankungen des Knochenmarks (Leukämien)

• Schädigung des Knochenmarks durch Bestrahlung oder

Zytostatika

• durch starken Blutverlust

• durch vorzeitige Hamolyse, durch Fehlen von Aufbaustoffen wie Eisen oder Folsäure

Hb wird durchReaktionslösung in Hämoglobincyanid umgewandelt. Der gebildete Farbstoff bei 546 nm photometrisch gemessen

Reaktionslösung enthält giftiges KCN (Kaliumcyanid). Vermeiden von Einatmen+ Hautkontakt. Lagerung in dunkler Flasche

• Photometer einschalten (Aufwärmphase)

• In je 2 Plastikröhrchen 5 ml Reaktionslösung geben (1x drücken)

• Patientenprobe (EDTA) vorsichtig mischen

• 20 ul Probe in die Reaktionslösung pipettieren (siehe Anleitung)

• Röhrchen verschließen und mischen, 5 min. inkubieren

• Küvetten überprüfen, Leerwert messen, Proben messen.

Extinktionen ablesen

Die in Lösung enthaltenen Teilchen absorbieren einen Teil des eingestrahlten Lichts. Je mehr Teilchen in der Lösung sind, desto mehr Licht wird absorbiert.

Extinktion = Logarithmisches Maß der Lichtabschwächung durch Absorbtion in einer Lösung

Blut nicht ausreichend gemischt

Pipettierfehler

Inkubationszeit nicht eingehalten

Küvetten nicht sauber

Küvetten nicht luftblasenfrei befüllt Falschen Filter im Photometer benutzt HB-Wert in der Tabelle falsch abgelesen

• Hohe Leukozytenzahl

• starke Vermehrung der Immunglobuline

• Ausgeprägte Hypertriglyceridämie

Frauen: 12-16 g/dl

Männer: 14-18 g/dl

Polyglobulie oder Polycythämie vera durch

• Sauerstoffmangel

• Erkrankungen KM

• Hormonstörungen (Erythropoetin), Nierenerkrankungen

• Doping beim Sport

• Blutverlust

• Erkrankungen des KM

• Hormonstörungen, Nierenerkrankungen

• Fehlen von Aufbaustoffen ( wie Eisen, Folsäure)

• Vorzeitige Hämolyse

Mittelwert * 36,8= g/ dl

• maligne Erkrankung der Pluripotenten Stammzellen

• langsam schleichender Verlauf

• exzessiv funktionstüchtige Granulozyten

•vorkommen aller grnulozytärer Vorstufen

•Philadelphia Chromosom positiv

vor einer Bluttransfusion

• bei Blutspendern und Patienten

• bei Schwangeren

Mit bekannten Testseren werden die unbekannten Antigene auf der

Erythrozytenoberfläche durch Agglutination nachgewiesen.

Kontrolle der im Serum regulär vorliegenden Antikörper

(Isoagglutinine) durch Agglutination mit bekannten Testerythrozyten

A1 , A2 , B und 0

Pseudoagglutination durch Geldrollenbildung

• Autoantikörper im Patientenserum

• Gabe von Plasmaexpandern

• Panagglutination durch bakterielle Verunreinigung

• Übersehen einer Hämolyse

• Probenverwechslung

• Zu schwache Agglutination

• Verwechslung Reagenzien

• Inkubationstemperatur oder –Zeit nicht eingehalten

• Mischfeldagglutinationen

vor einer Bluttransfusion

• bei Blutspendern und Patienten zur Erkennung von irregulären

AK,

• bei Schwangeren als Mutterschaftsvorsorge zur Erkennung von

irregulären AK

• zu untersuchendes Serum des Patienten + Testerythrozyten (Blutgruppe 0) mit bekannter Antigenstruktur

• Antigene auf Testerythrozyten korrespondieren zu den häufigsten Antikörpern.

• Im Serum: eventuell vorhandene irreguläre Antikörper binden auf der Oberfläche der Testerythrozyten.

Die Auswertung erfolgt visuell durch das Fehlen oder Vorhandensein

einer Agglutination

• positive Reaktion = Agglutination

• negative Reaktion = homogen

unsachgemäße Zentrifugation

• bakterielle oder andere Verschmutzungen von verwendeten

Materialien

• hämolytische und ikterische Seren/Plasmen

• Inkubationstemperatur und -Zeit nicht korrekt eingehalten

Vor einer Blutransfusion

Das zu untersuchende Serum des Patienten wird zu den

Konservenerythrozyten gegeben.

Sind im Serum des Empfängers irreguläre Antikörper vorhanden,

binden diese auf der Oberfläche der Spender-Erythrozyten.

Die Auswertung erfolgt visuell durch das Fehlen oder Vorhandensein

einer Agglutination

• positive Reaktion = Agglutination

• negative Reaktion = homogen

bakterielle oder andere Verschmutzungen von verwendeten

Materialien

• hämolytische und ikterische Seren/Plasmen

• Inkubationstemperatur und -Zeit nicht korrekt eingehalten