MiBi: Immunbiologie, ELISA

Enzyme linked immunosorbent assay

• eine an eine Oberfläche gebundene Immunreaktion

• Nachweis eines Antikörpers

• direkter Nachweis eine Antigens

  -> direkt Virus oder Abbauprodukt

direkter ELISA

direkter Nachweis eines Antigens

links positiv, rechts negativ

direkter ELISA bei positiven Befund

• Oberfläche der Mikrotiterplatte mit spezifischen AK von Ebola

• Patient Blutabnahme -> Extraktion des Blutserums -> Pipetieren auf Mikrotiterplatte -> spezifische Ebola AG binden an AK

• 1. Waschen

• Konjugat (spezifischer AK gegen das AG, mit Enzym gekoppelt) wird dazugegeben -> Konjugat bindet an AG

• 2. Waschen

• Substrat wurd dazu gegeben -> Enzym setzt Substrat um -> löst Farbreaktion aus -> positiver Nachweis

  Resultat: positiver Nachweis also Ebola und nun passive Immunisierung zum Behandeln von Patient

  
  

direkter ELISA bei negativen Befund

• Oberfläche der Mikrotiterplatte mit spezifischen AK von Ebola gecoatet

• Patient Blutabnahme -> Extraktion des Blutserums -> Pipetieren auf Mikrotiterplatte -> da keine spezifische Ebola AG vorhanden keine Bindugn

• 1. Waschen

• Konjugat (spezifischer AK gegen das AG, mit Enzym gekoppelt) wird dazugegeben -> Konjugat kann an nichts binden

• 2. Waschen

• Substrat wurd dazu gegeben -> da kein Substrat da, kann Enzym nicht umsetzen -> keine Reaktion da kein gebundenes Konjugat -> negativer Nachweis

  Resultat: negativer Nachweis also kein Ebola

indirekter ELISA

Nachweis der Antikörper

links positiv, rechts negativ

indirekter ELISA positiver Befund

• Oberfläche von Mikrotiterplatte mit spezifischen AG von Ebola gecoatet

• Patient Blutabnahme-> Extraktion des Blutserums -> Pipetieren auf Mikrotiterplatte -> in Blutserum enthaltene bereits gebildete AK gegen Ebola binden an spezifischen AG von Ebola

• 1. Waschen

• primärer AK (spezifischer AK gegen Ebola AK) wird dazugegeben -> primärer AK bindet an Ebola AK

• 2. Waschen

• Konjugat (Anti-Antikörper, sekundärer AK mit Enzym gekoppelt) wird dazu gegeben -> sekundärer AK bindet an primären AK

• Substrat wird dazugegeben -> Enzym setzt Substrat um-> löst Farbreaktion aus -> positiver Nachweis

  Resultat: positiver Nachweis also Ebola Infektion bereits durchgemacht

indirekter ELISA mit negativen Befund

• Oberfläche von Mikrotiterplatte mit spezifischen AG von Ebola gecoatet

• Patient Blutabnahme-> Extraktion des Blutserums -> Pipetieren auf Mikrotiterplatte -> in Blutserum sind keine bereits gebildete AK gegen Ebola vorhanden-> keine Bindugn an spezifischen AG von Ebola

• 1. Waschen

• primärer AK (spezifischer AK gegen Ebola AK) wird dazugegeben -> primärer AK kann an nichts binden

• 2. Waschen

• Konjugat (Anti-Antikörper, sekundärer AK mit Enzym gekoppelt) wird dazu gegeben -> sekundärer AK kann an nichts binden

• Substrat wird dazugegeben -> da kein Enzym vorhanden, keine Umsetzung des Substrats -> keine Farbreaktion-> negativer Nachweis

  Resultat: negativer Nachweis also bisher keine Ebola Infektion durchgemacht

Ist der erworbene spezifische Schutz gegen Krankheitserreger

nicht adaptiv

• Haut: Barriere, Säuremantel

• Magen: Magensäure

• Mund-, Nasen- und Rachenraum: Schleim, Lysozym, Nasenhaare, Niesreflexe, Flimmerepithel

• Augen: Lysozym, Wimpern, Augebrauen, Tränen

• Scheide: dödereihnsche Flora, Milchsäurebakterien

• Darm: Besiedlung mit körpereigenen Bakterien

• nicht adaptiv

• trifft ein Erreger in unseren Körper -> Eindringen verhindert durch natürliche Barrieren

• Mechanismen: Fieber; Komplementsystem; Monozyten + Granulozyten

Thermolabiler Proteinkomplex, der zur Lyse eines AG/AK Komplexes nötig sein kann

• Chemotaxis

• Opsonierung

• Lyse

adaptiv

• Lymphknoten: B-Zellen, T-Zellen

• humorale Immunantwort

• zellvermittelte Immunantwort

• Produktion von Antikörpern durch die B-Lymphozyten

• Abgabe von Antikörper ins Blut

• Immunantwort durch B-Zellen (AK)

• durch T-Zellen ausgelöst, die von einem passenden Antigen aktiviert wurde

• dabei vernichten einerseits zytotoxische T-Zellen infizierte Körper- oder Krebszellen und andererseits lösen T-Helferzellen weitere Immunreaktionen aus

  
  

  
  

• Immunantwort durch TH-Zellen (oder TC-Zelle-CD8) ~ vermitteln Apoptose

  
  

• Makrophage phagozytiert Virus

• Virusantigene werden von Makrophage präsentiert

• T-Helferzelle schüttet Interleukin aus

• B-Lymphozyten werden aktiviert

• Plasmazellen werden gebildet

• Synthese und Ausschüttung humoraler AK durch Plasmazellen

• Viren werden durch AK unschädlich gemacht

CD4 pos.: T-Helferzelle TCR -> MHC II

CD8 pos.: T-Killerzelle TCR -> MHC I

multiplizieren dann immer 8 als Antwort

antigenpräsentierende Zelle

• Präsentation von AG auf Zelloberfläche

unspezifisch- Monozyten, Makrophagen

unspezifisch

Phagozytose und Präsentation der Antigene auf Zelloberfläche

unspezifisch

• Fresszellen

• Phagozytose von AG & präsentieren Antigen auf Zelloberfläche

spezifisch

• Aktivierung durch TH Zelle

• Abtötung infizierter Zellen durch Perforine, wenn diese Antigene auf MHC1 tragen

• können Apoptose induzieren

• CD8 pos

spezifisch

• Regulation der Immunantwort

• beteiligt an humoraler Immunantwort, indem Förderung Differenzierung von B-Lymphozyten in AK-produzierende Plasmazellen

• Stimulation von B-Zellen

• werden aktiviert durch Makrophagen

• Aktivieren TC Zellen durch MHCII und Cytokine

• Bildung von TH Gedächtniszellen

• CD4 pos

spezifisch

• Unterdrücken Immunantwort

spezifisch

• spez. AK auf Oberfläche

• Aktivierung durch Bindung von AG

• Präsentation AG-MHCII Komplex an T Zelle

• Bildung von Plasmazellen + B-Gedächtniszellen

• langlebige B-Zelle, bei Kontakt mit spez. AG Bildung von Plasmazellen (direkt)

• bei sek. Immunantwort

• langlebige TH-Zelle

• schnelle Aktivierung der spez. Immunabwehr bei sekundärer Immunantwort

spezifisch

• Produktion von spez. humoralen Antikörpern

spezifisch

• ermöglichen bei Zweitkontakt mit Antigen schnelle Immunantwort

unspezifisch

• phagozytieren Krankheitserreger

unspezifisch

• Phagozytose von Krankheitserregern

unspezifisch

• Freisetzung von Histaminen

• Zeil eines spez. AG was an den variablen Teil eines Bestimme AK bindet

• varibaler Teil eines AK der an ein bestimmtes AG bindet

• AK von unterschiedlichen B-Zellen/Plasmazellen gebildet

• richten sich gegen das gleiche AG, jedoch binden an unterschiedlichen Epitopen

  -> Paratope unterschiedlich

• AK einer B-Zelle/Plasmazelle (oder Klone von dieser)

• binden an ein spezifisches Epitop

  -> Paratope indentisch + hohe Spezifität

auf Schleimhäuten der Atemwege, Augen und des Magen-Darm-Trakts, in Muttermilch

bei Parasiteninfektionen und Allergien erhöht

aktiviert Mastzellen

wird nach Erstinfektion gebildet

steht bei erneuter Erkrankung sofort zur Verfügung

größte Fraktion der Immunglobulin e

erstes nach AG Kontakt gebildetes Immunglobulin

genaue Funktion unbekannt

aktiviert vermutlich die B Lymphozyten

Örtlich und zeitlich gehäuftes Auftreten einer Infektionskrankheit

Zeitlich gehäuftes Auftreten einer Infektionskrankheit ohne örtliche Begrenzung

Vorkommen von Infektionskrankheiten in Bevölkerungskollektiven ohne zeitliche Begrenzung

Zahl der Erkrankten pro Bevölkerungskollektiv (zB 1000, 10000, 100000)

Zahl der an einer Krankheit Verstorbenen bezogen auf die Erkrankten

Übertragung des Erregers innerhalb einer Art (von Mensch zu Mensch Anthroponose)

• Gegeteil heterologe Infektkette: Errger von Tier auf Mensch oder umgekehrt

Lebendimpfstoff: enthält vermehrungsfähige Erreger

Totimpfstoff: enthält inaktivierte Erreger