Vorlesung 1

Diagnostisches Fachgebiet der Medizin —> optische, chemische und immunologische Verfahren

• Erkennung von Erkrankungen

• Verlaufs- und Therapiekontrollen

• Laborwerte sind wichtige klinische Parameter, die immer in Zusammenhang mit der Klinik interpretiort werden sollten

• Zeitnahe und sichere Bestimmung ist wichtig

• Verdachts- und Differentialdiagnostiken

= automatisierte Diagnostiksysteme

• in unserem Labor: Response 920, DiaSys

  • geschlossenes System mit automatischen Pipettieren und BArcode-Scanner

• Reagenzien-Teller mit Containern für jeden Test

  • ca. 40 versch. Tests

  • Mono- oder Twin-Container

• Küvettenteller mit mehrfach-verwendbaren Küvetten

  • funktioniert wie ein Photometer (UV-VIS-Bereich)

• Verschavhtelung der Tests automatisch möglich

ungesättigte Systeme in organischen Substanzen können im UV-VIS-Bereich angeregt werden (Doppelbindungen)

• NAD+ (oxid. Form) 260 nm maximum

• NADH (red. Form) 260 nm & 340 nm maximum

  • 260 nm wegen Adinin-Anteil

  • 340 nm die e- Verteilung wird durch Reduktion verändert —> am Nikotinanteil

• Extinktion E= der dekadische Log. des Intensitätsverhältnisses von eintretendem und austretendem Licht

—> Extiktionskoeffitient in L/mol*cm

• Absorptionsmaximum des Biuret-Reagenz bei 562 nm

  • Filter für 540 nm zur Messung im Praktikum

  • Man braucht eine WL mit deutlichem Unterschied zum Blank

• Absorptionsmaximum 293 nm

• Harnsäure schlecht lösbar, daher auch schlecht zu messen

  • Umwandlung zu Alatonin

  • kann man bei 293 nm messen

  • genauer Nachweis über HRP mittels H2O2 möglich

    
    

• Kinetikmessung der LAD-Enzym-Aktivität möglich

  • Umsetzungsmenge pro Zeit

• Endproduktbestimmung der Laktat-Konzentration möglich wenn man Reaktion rückwärts ablaufen lässt

• Im Test müssen enthalten sein:

  • ATP

  • Hexokinase

  • NAD+ oder NADP+

  • Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase

• In Probe liegt vor:

  • Glucose

• kommt in allen Muskeln vor und sorgt für Energiereserve für ATP-Gewinnung

• Creatinphosphat hat über 2 benachbarte Doppelbindungen hohes Übertragungspotenial, um Phosphat auf ATP zu übertragen

• Man misst NADPH-Zunahme

• Aspratat-Aminotransferase-Test bzw. Glutamat-Oxalacetat-Transaminase-Test

• in Leber für Stickstoffwechsel und bei Leber-Schaden ist Enzym im Serum nachweisbar

• Man macht sich die Malat-Dehydrogenase zu Nutze

• Dehydrogenasen

• Peroxidasen

• für Endnachweis!